Proteómica

Preparación y Envío de Muestras

La solicitud del análisis de proteómica debe realizarse a través de la Plataforma de Proteómica, mediante reserva de la franja horaria en la que se hará entrega de las muestras. Dentro de esta reserva, se encuentra la hoja de solicitud de análisis, que se debe cumplimentar correctamente incluyendo todos los apartados disponibles.

Las muestras pueden ser entregadas en solución, liofilizadas o en gel. Éstas deben estar preparadas con reactivos de alta pureza compatibles con la espectrometría de masas o agua milliQ y contenidas en plásticos de alta calidad.

Muestras Procedentes de Gel

Las muestras procedentes de gel deben manipularse con extremo cuidado para evitar contaminación con queratinas, que suelen proceder de manos, pelo y ropa de tejido animal, o con otros contaminantes que posteriormente puedan interferir en el análisis. 

Para el recorte de las bandas o spots se debe utilizar material, bisturí, pinzas o puntas desechables recortadas convenientemente, completamente limpio. Una vez recortadas, se colocarán en tubos eppendorf de 1,5 mL cubiertas de agua milliQ y perfectamente identificadas. Para prevenir cualquier tipo de contaminación, este proceso se llevará a cabo en una cabina de flujo horizontal. En el servicio hay disponible una cabina de flujo horizontal a disposición de los usuarios.

El grosor de los geles no deberá sobrepasar 1 mm y el porcentaje de acrilamida no excederá del 12% (recomendamos 10% de acrilamida). Se recomienda polimerizar el gel al menos 24 h antes de su uso para evitar acrilamida libre, no polimerizada, que puede reaccionar con los grupos amino de las proteínas durante la electroforesis en el gel.

Siempre deben incluirse en el gel marcadores de peso molecular. La tinción del gel puede llevarse a cabo con Commassie, sypro o tinción de plata compatible con espectrometría de masas. Las soluciones de tinción deben ser frescas.

Una vez teñidos, los geles se conservan durante algunas semanas en agua mili Q a 4ºC. Los geles así conservados pueden entregarse en el laboratorio junto con una imagen de los mismos donde se señalen aquéllas proteínas que se quieren analizar.

Entrega de Resultados

Los resultados de los análisis solicitados se enviarán por correo electrónico o se recogerán en el laboratorio d Proteómica.

El plazo de entrega de los resultados dependerá de la carga de trabajo del Servicio, así como de las características del análisis solicitado.