Investigadora Emergente IBIS 3
Título del proyecto: Optimización de dosificación de amoxicilina-clavulánico mediante modelo farmacodinámico en infecciones por Escherichia coli: papel de los mecanismos de resistencia. Proyecto ConClavE.
Financiación: 92.000€
Organismo financiador: Instituto de Salud Carlos III
Resumen:
HIPOTESIS: La resistencia de bajo nivel a AMC en aislados de E. coli (CMI cercanas al punto de corte de sensibilidad EUCAST) puede estar relacionada con la expresión de determinados tipos de betalactamasas. La optimización de las dosificaciones de la combinación amoxicilina-clavulánico es posible para mejorar la inhibición de determinadas betalactamasas en E. coli. OBJETIVOS: Determinar en aislados de E. coli con CMI de AMC cercanas al punto de corte (CMIs de 8-64 mg/L) i) los mecanismos de resistencia a AMC más relevantes, y ii) la eficacia de la dosis estándar (1g/200 mg Q8h), elevada (2g/200 mg Q8h) o altenativas de AMC con un modelo dinámico de infección (Hollow-fiber). METODOLOGIA: Se incluirán aislados de E. coli con CMIs de AMC 8-64 mg/L, seleccionados de estudios competitivos multicéntricos previos de pacientes con bacteriema. Objetivo 1: se obtendrán las secuencias de los genomas completos (MiSeq, Illumina). Se identificarán los genes de betalactamasas (TEM-1, SHV-1, IRTs, OXA-1) presentes en los aislados, usando ResFinder y CARD. Se detectarán cambios o mutaciones en zonas reguladoras (promotores, regiones atenuadoras, secuencias de inserción corriente arriba). La hiperproducción de betalactamasas se confirmará mediante ensayos de expresión génica (RT-PCR en tiempo real con SYBER Green I). El número de copias de los genes de betalactamasas plasmídicas se determinará mediante PCR en tiempo real con SYBER Green I. Objetivo 2: Los estudios de sinergia entre amoxicilina y ác clavulánico se realizarán mediante la técnica de tablero de ajedrez usando rangos de concentraciones que incluyan la CMI y la C máx de cada uno de los fármacos. Las curvas de letalidad se realizarán en CA-MHB (CLSI) con concentraciones de AMC equivalentes a la CMI, y la C máx . Objetivo 3: La determinación de amoxicilina y ácido clavulánico se realizará mediante HPLC asociada a detector UV-DAD. La eficacia de las dosis de AMC se determinará a partir de estudios PK/PD realizados en un modelo dinámico de infección de hollow fiber). AMC se infundirá en 30 minutos. Los perfiles farmacocinéticos (PK) humanizados se simularán usando el software ADAPT5 (BMSR), utilizando los parámetros PK obtenidos en humanos para amoxicilina (C máx =105.4 mg/L y t1 /2 =0.9 h).
IP: Mercedes Delgado Valverde
coIP: Álvaro Pascual Hernández
Otro personal adscrito al proyecto:
- Vicente Merino Bohórquez
- Inés Maria Portillo Calderón
- Elena Salamanca Rivera
- Sara Díaz Díaz
- Carmen Hidalgo Díaz
- Sofía Asensio Gallego
